【蛋白质特异性断裂试剂的合成及其对蛋白质的断裂研究】厉廷有.pdf

目間录提要第一章:前言第二章:文献综述 2:断裂机理 2:断裂试剂对蛋白质的特异性断裂作用 2:断裂试剂在医学上的应用第三章:实验材料和方法 3:实验试剂 3:试剂的处理 3:实验方法第四章:实验部分 4:双功能断裂试剂的合成 4:BAPB-EDTA的合成 4:BA-HPTA的合成 4:疏基枯草杆菌蛋白酶的制备 4:断裂试剂BAPB-EDTA与蛋白的偶连及切断 4:试剂与巯基枯草杆菌蛋白酶的偶连及切断 4.

第一章前言生物学的发展日新月异,人类正在生活的各个方面充分享受着由生物学发展而来的重重好处,然而对作为生物学物质基础之一的蛋白质的详细的结构研究却远远滞后于生物学的高速发展.这就给蛋白质结构和功能之间关系这一重大课题的研究带来了巨大困难,也妨碍了我们对蛋白质这一生命体最重要组成部分的根本认识.蛋白质三维结构的获得主要通过对蛋白质晶体的X-Ray分析,然而,许多蛋白质分子现今仍难以得到完美的可供分析的晶体,因此大大限制了X-Ray在此领域的作用.现代核磁技术的发展给蛋白质结构的研究带来了新的实验手段,但目前它仅仅只能研究在特殊条件下部分折叠的小分子量蛋白分子在溶液中的构象.

通过上述机制产生的OH进攻邻近的肽键,使肽键断裂。Kim 等通过 DTT－Fe2体系对酵母谷氨酰胺合成酶(GS)的切断研究有力地支持了上述理论。他们用DTT－Fe2+体系切割酵母谷氨酸酰胺合成酶(GS),GS被降解为片段。如在体系中加入过氧化氢酶或超氧化物歧化酶则能保护GS免受降解,这与H2O2及O2是OH 产生的中间体的假说是一致的。但Kim等同时发现,自由基清除剂对GS保护效应很小,他们认为自由基只产生于蛋白质特定部位,在它们向外扩散遇到清除剂之前,就与邻近的氨基酸肽键发生反应,自由基的产生不会造成蛋白的大范围降解。