【胰蛋白□抑制剂的筛选及其与胰蛋白□识别规律的研究】方锐.pdf

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胰蛋白酶抑制剂的筛选 及其与胰蛋白酶识别规律的研究 方锐 专业:生物化学 导师:李惟教授 一九九六年六月提要 我们分别以完整的胰蛋白酶分子和模拟胰蛋白酶底物 结合部位的模型六肽(Asp-Gly-Gly-Ser-Ala-β-Ala)为受 体分子在噬菌体肽库中进行筛选。经过亲和性筛选、胰 蛋白酶抑制活性分析、DNA序列分析,我们成功地获得 了几种具有胰蛋白酶抑制活性的噬菌体肽序列和三肽抑 制剂Ac-Val-Arg-Ser-oMe。我们分析了胰蛋白酶与其抑 制剂间的识别规律,认为胰蛋白酶底物结合部位的 Asp、Ser,胰蛋白酶抑制剂的Arg或Lys以及其他几个极 性氨基酸残基是两个分子识别与相互作用的关键基团.本项研究的结果有力的支持了蛋白质分子间识别为“小 区域”识别的观点。力学本质并没有定论,一般认为是一种驱动的过程,的增加是介质水有序度改变的结果。疏水相互作用的 强度很难定量,有文献报道认为大约为25ca1/A[2].在人们认识蛋白质间识别规律的过程中,首先针对 酶与底物专一性识别的机制提出了种种模型和假说。如“锁钥学说”,认为底物分子或底物分子的一 部分象钥匙那样,专一性地楔入到酶的活性部位,也就 是说底物分子进行化学反应的部位与酶分子上有催化效 能的必需基团间有紧密的互补关系。“三点附着”学说 解释了酶对底物的立体选择性,指出酶对底物的识别位 点至少有三点,只有三点都互补匹配时,酶才作用于底 物分子。