【牛白细胞介素2基因的克隆序列高效表达纯化及活性研究】李涛.pdf

目 前言 一、IL一2的发现、命名、理化性及生物学活性 二、重组IL一2的研究 三、重组牛IL一2的研究现状 四、1L一2研究的发展前景 参考文献.摘要 材料与方法.第一部分,牛IL-2的mRNA提取及cDNA 的克隆 第二部分,重组牛IL一2基因的序列测定 第三部分,重组牛IL一2表达载体的构建 第四部分,重组牛IL一2活性蛋白的纯化 第五部分,重组牛IL一2活力的测定 结果 讨论 、mRNA的分离
Iymphocylemitogenicfacior)、”致母细胞性因子”(Blaslogenicfaclor)T细胞激活因子(TCell activalioniac1or)。1976年,Morgan等发现.将T细胞丝裂原(PHA)刺激的人PBL(periphara1 bloodlymphocylel培养上清加入体外培养的人白血病细胞 或骨髓细胞之后,该上清可导致上述细胞的体外增殖,作者当 时将这种上清称为”条件培养基”(comditionmedium.CM)I=)表型分析及功能测定均证实,CM先后在体外建立了小鼠CTL和 Th细胞克隆。
表1天然1L-的理化特性 理化特性 纯化-1大鼠 分子量(聚丙烯酰胺凝胶电泳)15k DEAE洗脱盐浓度(PH7)等电点(p1)PH稳定范围 1.4m01/L尿素中的稳定性 稳定 蛋白酶酸碱性 敏感 神经氨酸苷酶敏感性 不敏感 DNA酶I敏感性 不敏感 RNA酶A敏感性 不敏感 热处理后活性(6℃小时 存在 热处理后活性0℃分钟!存在 热处理后活性(70℃小时)丧失 -疏基乙醇还原敏感性 不敏感 3-的生物学活性 IL-!的主要靶细胞是T淋巴细胞. 