【大鼠颌下腺上皮细胞培养系统的建立及形态学观察】刘音.pdf

在我攻读硕士学位的三年中,得到我的导师欧阳教授的悉心指导,从选择课题、实验设计、完成实验、论文撰写都是在导师的道接指导和严格要求下进行的,在此完成学业之际,谨向我尊敬的导师致以衷心的感谢。

摘要体外培养颌下腺上皮细胞为研究其分化、生物学特性以及涎腺上皮性肿瘤的发生机制等提供了一个理想的实验模型。颌下腺是由三种上皮细胞构成即:腺泡上皮细胞、导管上皮细胞及肌上皮细胞。近几年来随着培养技术的提高,对这一功能单位的研究已成为探讨涎腺疾病发生的主要途径.本实验从出生8天的Wistar大鼠的颌下腺中分离出上皮细胞,在铺有鼠尾胶原的DMEM培养基中培养。同时在培养基中加入表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松等生长因子,以促进上皮细胞生长。传代时,先用0 EDTA去除成纤维细胞,再用0 胰蛋白酶消化传代,此方法可有效地抑制成纤维细胞生长。

前言细胞培养是从体内取出细胞模拟体内生理环境,在无菌、适温和特定营养条件下,使之生存和生长,并维持其结构和功能的方法。细胞培养的发展经过近百年时间,经历一个由简单到复杂的发展过程.1907年,美国生物学家Harrison在无菌条件下,以淋巴液为培养基成功地在试管中培养了蛙胚神经组织长达数年之久,创立了体外组织培养和细胞培养的基本模式系统。1951年Eagle等开发了能促进动物细胞体外培养的培养基。1957年Dulbeccc 等采用胰蛋白酶消化处理和应用液体培养基的方法,获得了体外单层细胞培养3。单层培养法的出现对组织培养的发展起了很大的推动作用。