【聚合□链反应检测肺炎支原体及临床意义】刘焕星.pdf

在三年研究生学习期间,导师谭可安教授、潘国强副教授给予我悉心的指导和殷切的教诲,借此论文首页,向我的导师表示由衷的敬意并致以深深的谢意！

摘要本研究应用聚合酶链反应(Polymerasechairreac -tionPCR)检测肺炎支原体DNA,根据肺炎支原体iMP 45KDa蛋白编码基因序列设计合成-一对引物,对5种支原体、4种细菌DNA进行PCR检测,观察该引物的特异性。用从肺炎支原体标准株(FH株)提取的DNA为模板,以检测该反应的敏感性。对174份临床标本(咽拭子)进行PCR检测同时对174份血清标本进行ELISA检查.在敏感性实验中,从肺炎支原体标准株(F株)提取 DNA,定量后系列稀释,分别用作模板进行PCR检测,在相当于100fg的模板DNA含量的标本中仍可见144bp扩增带。

前言在世界范围内,肺炎支原体的感染广泛存在,肺炎支原体是呼吸道感染疾病的重要病原体,是慢性阻塞性肺部疾病急性发作的重要病原体之-口8。过去认为肺炎支原体是一种温和的呼吸道病原体,越来越多的资料表明它可引起严重的双侧肺炎及其并发症Ⅱ1。肺炎支原体感染在治疗上与其它微生物感染不尽相同。因而早期快速、准确的检测肺炎支原体,具有实际的临床意义和流行病学价值,自前,肺炎支原体检测手段有分离培养与免疫学方法检测抗原和抗体几种。肺炎支原体在培养中对培养基要求的条件高,且时间长、易污染、阳性率低等不足、血清抗体检测,如间接血凝试验、间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验等均存在着敏感性低或