[重组人卵泡抑素的表达及其双位点ELISA检测法的建立]董学斌-V2

【重组人卵泡抑素的表达及其双位点ELISA检测法的建立】董学斌.pdf感谢我的导师柳忠辉教授给予的 细心教育和精心指导,引导我走上献身科学的道路！(二)第二部分双夹心ELISA法的建立1.融合蛋白GST-FS288抗血清的制备 2.融合蛋白GST-FS288抗体的亲和层析纯化 3.间接ELISA法检测纯化的兔抗follistatin抗体 4.双夹心ELISA法第三章结果.一、第一部分重组融合蛋白FS的构建、表达 1.RT-PCR法获得FS-288cDNA2.FS-288cDNA的TA克隆3.表达质粒pGEXFS-288的构建及鉴定 4.GST融合蛋白的诱导表达及纯化.纯化重组蛋白FS-288生物学活性的测定白求恩医科大学硕士学位论文 明为重组融合蛋白FS-288.3.重组蛋白FS-288生物活性鉴定 activin结合活性采用标记配体杂交法.抑制活性采用单 层培养垂体细胞分泌FSH测定法,其结果与天然FS生物学活 性一致.4.融合蛋白免疫动物获取针对FS抗体 纯化融合蛋白免疫家兔获得的抗血清,经45 硫酸铵粗 提、ProteinA亲和层析纯化,并经GST亲和层析柱吸附除去 抗GST抗体,获得兔抗FS多克隆抗体。采用重组FS蛋白免 疫Ba1b/c小鼠获得单克隆抗体.5.双夹心ELISA法的建立和应用 采用针对follistatin的特异性抗FS多抗及McAb,建 立了双夹心ELISA法.
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