【人体胎盘神经生长因子的纯化鉴定及其胃蛋白□裂解片段生物活性的研究】刘永茂.pdf

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目录 一.摘要 二.前言-三.材料和方法-(一)材料、试剂和主要仪器(二)实验方法-1.胎盘中神经生长因子的分离纯化 2.神经生长因子的活性鉴定 3.纯度鉴定-10 4.等电点测定 5.分子量测定 -11 6.B-NGF的胃蛋白酶切割修饰-11 7.蛋白质定量-11 四.实验结果 -12 五.讨论 -19 六.感神经纤维长入r]:1952年Levi-Mo-ntaicini将S-180和S-37 瘤块与7-9天龄的鸡胚的感觉和交感神经节一起培养,24小时后 长出浓密的神经纤维晕r]:1964年Levi-Montalcini和Cohen发 现了蛇毒中含有大量的神经生长活性物质:1968年Levi-Mon-talcini又发现小鼠颌下腺含有丰富的这种促神经生长物质 ],并定名为神经生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)1960年CoheD 由小鼠领下腺提取出NGF纯品r。作用通过对神经节培养方法得到鉴定。在无NGF的培养基上,神 经元在24小时内即死亡.如果每天加入10-100ng/m1的NGF,神经元可持续生长,并形成密集的神经纤维网,这主要是由于加入 NGF后神经元分化加快,轴突物质产生多,不发生细胞自然死亡的 结果。NGF抗体(AD-NGF)可阻止NGF的上述作用。给新生、成龄 啮齿类或其它哺乳类动物注射抗NGF抗体,可使其椎旁、椎前大 量交感神经节的肾上腺素神经元破坏,这种作用称为免疫去交 感作用 6。先天补体缺陷的小鼠可发生免疫去交感作用,说明 此现象是内源性NGF灭活所致,而与补体介导的免疫反应无关 ]。