【变形链球菌细胞外葡萄糖基转移□的分离和纯化】於维先.pdf

目摘要前言材料和方法一、细菌培养二、葡萄糖基转移酶的提取 1、葡萄糖基转移酶的粗提 2、葡萄糖基转移酶的纯化三、测定蛋白质的含量四、葡萄糖基转移酶活力的测定五、葡聚糖的测定六、聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定酶的组成成份及酶的纯度结果讨论一、变链菌葡萄糖基转移酶的分离、纯化二、变链菌葡萄糖基转移酶的多形性及各菌间抗原的相关性三、变链菌产生细胞外非水溶性葡聚糖的机制结论致谢参考文献英文摘要附照片

MT6R的55 乙醇沉淀所提取的酶进行羟基磷灰石层析,得两个蛋白吸收峰,第一峰是非水溶性葡萄糖基转移酶,比活力7l.U/mg蛋白纯化倍数为240倍,经园盘电泳显示蛋白染色及酶活力染色均为单一带。说明此酶为均一的．第二峰是水溶性葡萄糖基转移酶,比活力为 3/mg蛋白,纯化倍数为106倍,经园盘电泳显示2-3条蛋白染色带及二条酶活性染色带,说明此酶为非均一的。

学者已进行了变链菌胞外葡萄糖基转移酶的提取。Guggehein在1969 年首次从变链菌0MZ176(血清型d)菌株培养物上清中分离提取葡萄糖基转移酶,发现此胞外酶具有多形性。以后Ciardi等人[7]进行变链菌胞外酶的提取,同样也证实了这一点。Shimamura和Fukui在1982年[89] 分别从变链菌6715和6715-15菌株培养物上清液中分离纯化水溶性及非水溶性葡萄糖基转移酶。已获得成功,经电泳鉴定为均一带,但目前国内尚无人分离、纯化水溶性及非水溶性葡萄糖基转移酶,只是朱华等人[10]在1989年从变链菌培养物上清液中提取葡萄糖基转移酶的租酶,但没有进一步纯化。