[变形链球菌细胞外葡萄糖基转移□的分离和纯化]于维先

【变形链球菌细胞外葡萄糖基转移□的分离和纯化】於维先.pdf目 摘要 前言 材料和方法 一、细菌培养 二、葡萄糖基转移酶的提取 1、葡萄糖基转移酶的粗提 2、葡萄糖基转移酶的纯化 三、测定蛋白质的含量 四、葡萄糖基转移酶活力的测定 五、葡聚糖的测定 六、聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳鉴定酶的组成成份及酶的纯度 结果 讨论 一、变链菌葡萄糖基转移酶的分离、纯化 二、变链菌葡萄糖基转移酶的多形性及各菌间抗原的相关性 三、变链菌产生细胞外非水溶性葡聚糖的机制 结论 致谢 参考文献 英文摘要 附照片MT6R的55 乙醇沉淀所提取的酶进行羟基磷灰石层析,得两个蛋白吸 收峰,第一峰是非水溶性葡萄糖基转移酶,比活力7l.U/mg蛋白 纯化倍数为240倍,经园盘电泳显示蛋白染色及酶活力染色均为单一 带。说明此酶为均一的．第二峰是水溶性葡萄糖基转移酶,比活力为 3/mg蛋白,纯化倍数为106倍,经园盘电泳显示2-3条蛋白染 色带及二条酶活性染色带,说明此酶为非均一的。学者已进行了变链菌胞外葡萄糖基转移酶的提取。Guggehein在1969 年首次从变链菌0MZ176(血清型d)菌株培养物上清中分离提取葡萄糖基 转移酶,发现此胞外酶具有多形性。以后Ciardi等人[7]进行变链菌胞 外酶的提取,同样也证实了这一点。Shimamura和Fukui在1982年[89] 分别从变链菌6715和6715-15菌株培养物上清液中分离纯化水溶性及非 水溶性葡萄糖基转移酶。已获得成功,经电泳鉴定为均一带,但目前 国内尚无人分离、纯化水溶性及非水溶性葡萄糖基转移酶,只是朱华 等人[10]在1989年从变链菌培养物上清液中提取葡萄糖基转移酶的租 酶,但没有进一步纯化。
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