[产毒性大肠杆菌R质粒及肠毒素质粒的实验研究]陈群

【产毒性大肠杆菌R质粒及肠毒素质粒的实验研究】陈群.pdf目間 摘要 材料与方法 一、实验菌株 二、培养基 三、药物敏感性最小抑制浓度(MIC)测定 四、接合试验 1、体外试验 2、体内试验.五、转化试验 六、质粒DNA的提取 七、琼脂糖凝胶电泳及质粒大小的计算 八、质粒DA酶切 九、平板免疫溶血试验 十、小鼠肠祥结扎实验 十一、LT肠毒素对HeLa细胞的影响 十二、主要仪器 结果摘要 对长春市婴儿腹泻患者分离的3株产毒性大肠杆菌(ETEC)84010,84053,84056 在系统鉴定与药物敏感性试验的基础上,进行了系统的R质粒与Ent质粒的检测。通 过接合试验(体外法、动物体内法)和转化试验,证明了三株大肠杆菌的多重耐药性 与R质粒的关系。体外接合试验表明:三株大肠杆菌能将其部分抗性传递给受体菌 C600,传递的抗性范围是:84010菌对TC和AP的抗性,84053菌对SM的抗性,84056菌 对TC的抗性。接合频率10-一10*。84010和84056菌对TC的抗性还能传递到绿脓 杆菌P97中去。质粒上。因此命名为Ent质粒。Neter在1979年也指出LT的产生受质粒拦制.Ent质粒不仅可以在同种间传递,亦可在不同种间传递,其结果使大肠杆官以外的 某些种细菌也可获得产生LT肠毒素的能力。因此,使对引起膜泻症的微生纪学诊断 更为复杂化了.子生物学技术。它包括用琼脂糖凝胶电泳检测细菌质粒特征(plaseidp::file 简称PP图谱),和采用限制性核酸内切酶(简称内切酶)对质粒A作同源性一析、该 技术目前已用于医院内革兰氏阴性菌和葡萄球菌属感染的流行病学误查。“ 也能对医院外沙门氏菌病进行监测及传染源的追踪。
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