【体外培养癌细胞的同步化及其在不同时相形态结构与机能研究】赵培林.pdf

比文越目,体外培养癌细胞的国步化及其在不同时相形态结构与机能研究院部系所:丞础医学部专业:组织旺胎学研究生短名:赵培称指导级师:致统势副教授(社名以称)陈玉兰主管技师

细隐周期是指细泡从一次分裂后开始生长,到下次分裂结束所经历的一系列生物化学变化的连续过程,是细胞的一种生命现象,与有机体的发生,生长。细胞分化,生理性再生。创伤修复及肿瘤的发生等密切相关.细胞周期的概念是于1951年由英国的Howara首先提出.D NA的合成是在分裂期之间。1959年QuastLer 和 Sherman(3垃用放射性同位宗E标记D NA的前驱物胸腺嘧啶该苷(Ta3)进行实验,确定了细胞周期是由G,期、S期、2 期及卫期组成,并提出了测定细胞周期时闫的方法。为了对处于细胞周期不同时相的细胞进行精确的分析性研究而建立了细胞同步化方法。

二、细胞培养取处于对数增生期的HeLa细泡及HEP一2细胞,弃去旧营邪液,应用EDTA将细胞由瓶壁分离,加入含有15 小牛血清及及抗生素的RPMI一1640营养液:用吸管轻轻吹打,制成细胞悬液,并进行细跑计数,将细胞悬液接种于装有盖片的小培邪瓶内,每瓶接种细胞1×10”个,置37℃温箱中静置培养,48小时后,在倒置显微镜下选出细胞生长良好者换液备用.三,细胞同步化将培至48小时的细胞换入每毫升含2毫克分子胸腺嘧啶核苷的营养液,继续培养24小时后,以预热至37C的Hanks液洗3次,然后移至常规培养液中,解除同步。