【家蚕消化液35K蛋白□及其基因研究】.pdf

单位代码:研究生学号:95Q0550 家蚕消化液35K蛋白酶及其基因研究论文答辩日期:答辩委员会主席:(姓名、职称、单位)论文评阅人:(姓名、职称、单位)

致谢本论文的研究是在导师吴玉澄教授和藤井博教授悉心指导下完成的.本论文的试验研究工作大部分是在日本九州大学农学部家蚕基因资源开发与研究中心和蚕学讲座研究室完成的。在试验进行过程中,得到了伴野豐副教授、日下部宜宏博士的精心指导及古贺克已教授、河口豐副教授和大城户利久博士的热情指点.得到了各位技官、研究室的同仁及蚕学讲座白尾吏、太田敦子、小食一朗、北佳、林亞紀、宫川世志幸等同学的热情帮助。在九大期间,还得到了古野玉江女士的关心和帮助。九州大学农学部郑绍辉博士及浙江大学华跃进教授提供了部分参考资料。

筛选了35K蛋白酶的cDNA克隆。该cDNA克隆由1021bp的碱基序列构成,其中包括poly(A)、poly(A)信号序列及939bp的开放阅读框。由开放阅读框碱基序的35K蛋白酶氨基酸序列一致。与其它丝氨酸蛋白酶比较,35K蛋白酶氨基酸序列中,与触媒作用有关的组氨酸(His-57)、天冬氨酸(Asp-102)、丝氨酸(Ser- 195),与基质结合特异性有关的第189位的Ser(胰凝乳蛋白酶的特征氨基酸),及形成3个二硫键的6个半胱氨酸残基(42和58、168和182、191和220)等序列在胰蛋白酶族中,已发现多种含6个以上半胱氨酸残基的蛋白酶,但在胰凝乳蛋白酶族中,35K蛋