【败血症及临床常见细菌16S-23SrRNA基因区间的分子生物学研究】.pdf

目录论文摘要中文英文正文:败血症及临床常见细菌16S-23SrRNA基因区间的分子生物学研究.前言第一部分:不同菌种16S-23SrRNA基因区间的PCR图谱一种细菌16S-23SrRNA基因区间的PCR图谱二.葡萄球菌属中11个不同菌种的16S-23SrRNA基因区间的研究小结参考文献.第二部分:14种菌的RFLP分析及2种菌的区间分子克隆测序小结参考文献第三部分:16S-23SrRNA基因区间对临床细菌感染病原诊断的应用研究小结参考文献.综述一.

不能通过水煮裂解而扩增。Che1ex100裂解法能一步裂解所研究的菌种,扩增条带清晰,明亮,方法简便快速,污染机会少。经典的酚氯仿抽提细菌DNA 进行PCR扩增,需将DNA在不同的管之间转移,步骤繁琐,增加污染机会.最终确立Chelex100裂解法为本课题研究的细菌裂解方法.经PCR扩增后,13个菌种呈单一条带,其中5种菌:产单核李斯特氏菌、脑膜炎败血黄杆菌、嗜水气单胞菌、阴沟肠杆菌、类白喉棒状杆菌能立刻区分,2种分枝杆菌具有与其它细菌不同的特异性条带(1800bp),还有6 种菌不能区分.

它们,结果肺炎克雷伯氏菌被切成778bp和130bp两个片段,而坚韧肠球菌缺乏这个酶切位点,不能切断,以此区别这两种菌。至此,我们建立了42个菌种的标准DNA图谱.第三部分 16S-23SrRNA基因区间对临床细菌感染病原诊断的应用研究对42例新生儿败血症血标本、15例对照组新生儿血标本及6例疑似化脑的脑脊液标本分别进行细菌培养及16S-23SrRNA基因区间的PCR扩增和进一步的RFLP分析,探讨该技术在临床细菌感染病原诊断的应用价值.结果42例新生儿败血症血培养15例阳性,27例阴性,阳性率35 .