[原位杂交检测三个新基因在大肠癌中的表达]

【原位杂交检测三个新基因在大肠癌中的表达】.pdf叶锋 方士昌 原位杂交检测三个新基因在大肠癌中的表达 浙江大学医学院肿瘤学 97级硕士研究生:师:导原位杂交技术及其进展(综述)摘要:原位杂交是检测和定位细胞、组织和染色体中特异性核酸序列的重 要技术。作为形态学和分子生物学的完美结合产物,原位杂交技术已被认 为是细胞分子生物学、遗传学和病理学等领域中极有价值的研究手段。本 文概述了原位杂交的历史沿革、实验步骤以及技术改良和进展。指出结合 其他先进技术和本身多种技术改良方法的相互结合,是原位杂交不断优化 原位杂交(Insituhybridization,ISH)是应用特定的标记的已知的核酸探 针与组织或细胞中的待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成 杂交体,然后应用与标记物相应的检测系统,使杂交后的信号在原有的位 ISH技术是以H已取得许多进展i31。Padlock探针是寡核苷酸,它能依靠核酸的靶点识别 进行粘合成环状,从而被它们的靶局部捕获。因此,这些探针可提供特异 性检测和低背景。它可检测着丝粒重复序列的单基因误配(14].根据标记物不同,探针又可分为同位素类和非同位素类。前者主要包 括H、35S、32P、14C、I25I等标记探针。尽管近年来非同位素标记ISH 的兴起,但由于放射自显影检测技术具有敏感性高,易于定量分析等优点,同位素标记探针ISH仍在一些领域被认为是“金标准”。非同位素标记物 主要有生物素(Biotin)、荧光素(Fluorescein)、地高辛(Digoxigenin)等。
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