【大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒过程中磷脂□D活性的变化】.pdf

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目 誉 中文摘要 二、英文摘要 三、论文正文 1.引言 2.材料 3.方法 4.结果 5.讨论 6.结论 7.附图 8.参考文献 四、综述 五、致谢浙江大学医学院硕士论文 大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒过程中磷脂酶D活性的变化 原攻击后细胞PLD活性与细胞脱颗粒的时相、量效变化及PLD抑制剂对 中所起的作用及经典平喘药沙丁胺醇、异丙肾上腺素、色甘酸钠对其影 响.方法:采用主动致敏的RPMC为实验材料,细胞脱颗粒以细胞B-氨基已糖 苷酶(B-hexosaminidase)释放率为指标,细胞PLD活性采用发光法检测.酶催化生成甜菜碱和过氧化氢(H02),再利用发光法测定生成的HO2.即H202在过氧化物酶的作用下能将其所携带的能量传递给冷光剂鲁米诺(Luminol),使鲁米诺处于激发态,当激发态的鲁米诺退激到基态时,会 产生波长为425nm的浙江大学医学院硕士论文 大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒过程中磷脂酶D活性的变化 性及细胞β-hexosaminidase释放率均降低到对照水平,表明正丁醇对致敏 RPMC受抗原攻击后的B-hexosaminidase释放及PLD活性变化有剂量依赖 性抑制作用。PLD的竞争性抑制剂2,3-DPG在10mmolL时能显著抑制 PLD活性,且完全抑制细胞β-hexosaminidase释放。PLD途径上游的抑制 剂Wortmannin,为PI3-激酶的抑制剂,300nmolL-Wortmannin能显著 抑制PLD活性,并减少细胞β-hexosaminidase释放。