【反义核酸基因重组体的构建及抗乙型肝炎病毒的实验研究】.pdf
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2.反义核酸表达载体构建用BamHI酶切真核表达载体PBK-CMV质 粒,并用碱性磷酸酶处理粘端空载体,与反义核酸基因以适当比例混合,用 T4DNA连接酶连接,并转化感受态EcoliInVaF细菌,铺板后挑选白色 菌落,用PCR和酶切法筛选阳性克隆,再用PCR鉴定目的片段插入方向.结果目的基因片段与真核表达载体连接成功,而且筛选出相反方向插入的重 组体.3.反义核酸表达载体转染2细胞实验分三组:PBK-ANTIC组、PBK-CMV、空白组,每组设5个复孔:2细胞从液氮中取出复苏.培养.传代,分装于24孔培养板。改良S.n.A.p.
studyoncloningandanti-HBVeffectof antisensegene MedicalschoolofZhejiang University intenalmedicine(epidemiology) Postgraduate97 Shaojunbin Advisor prefessorZhangmingtai abstract AntisenseOligonucleotideisashort lengthDNAorRNAthatcanbindwith specialsequencemessageRNA inmanner of A-TandG-C,and inhibit