【人His6-TNFβ质粒的构建及其产物一步纯化法的研究】.pdf
目 一、中文摘要 二、外文摘要 三、论 1.序 2.实验材料 3.实验方法 4.实验结果 5.讨 6.结 7.参考文献 8.
ConstructionofHumanHis6-TNFBRecombinantPlasmid andSingle-stepPurificationofExpressedProduct Abstract Inorder toraiscthcexprcssionlevelandpurificationefficiency ofHuman TNFB(Tumor necrosis factor bcta),a 560bp TNFB fragment taken down from thc PBV-y TNFB plasmid was cloned into high expression vector
用以组建人TNFB,pET-28-A、B、C不仅是一种含有T1ac启动子和His6与凝血酶位点等元 件的融合表达载体,而且具有三个不同阅读框和多克隆位点,易于外源基因的重组和筛选.此外,该质粒所含的His6融合系统可使基因表达产物的N端或C端融合His6-tag。因此可利 用Ni离子整合树脂柱对表达产物进行快速亲和纯化。His6-TNFB表达物可利用凝血酶酶切 位点切除His6。通过组建人His6-TNFB融合表达系统和金属配体亲和柱层析(lmmobilizedmetalaffinitychromatographyIMAC),以期获得高表达、高纯度和高活 性的TNFB产物、为进一步研究TN