【人胸腺素α1的基因克隆及表达研究】.pdf

目录一、中文摘要二、英文摘要三、论文正文 I:人胸腺素α1原核表达重组体的构建及其在大肠杆菌中的表达口II:人胸腺素α1真核表达重组体的构建及其转染人外周血淋巴细胞对后者免疫活性的影响-34 四、综述 I:胸腺素α1研究进展 II:核酶在肝脏疾病基因治疗中的研究进展五、致谢-65

本研究通过人合成的方法获得Tα1基因,然后将其克隆入原核细胞表达载体pGEMEX1,用重组体转化人肠杆菌,并从mRNA和蛋白质水平检测重组体在大肠杆菌中的表达情况,为将来获得基因1程Tα1 多肽产品奠定基础。(一)人胸腺素α1基因的获取以人I方法合成Tα1正链DNA,经聚合酶链反应(PCR)技术扩增得到双链Tα1基因,并在其两端加上EcoRI、BamHI酶切位点及起始密码子(ATG)、终止密码子(TAG),以便下一步的克隆操作。

胞上消中IFN-r值为62pg/ml,而转染pBK-CMV的PBL细胞和I未作转染的PBL细胞分别为20pg/ml和l21pg/ml。转染pBK-Tα1的PBL细胞上清中IL-2值为105pg/ml,而转染pBK-CMV的PBL细胞和I未作转染的 PBL细胞分别为40pg/ml和l28pg/ml.结论:1.成功构建了人胸腺素α1真核细胞表达重组体pBK-Tα1.在基因转录水平上证实,pBK-Tα1可以在PBL细胞中转录出 Tα1mRNA.3.初步证实pBK-Tα1转染入PBL细胞可促进IFN-Y、IL-2的表达和T淋巴细胞表面E受体的产生。