[人IFN-γTNF-β融合蛋白在大肠杆菌的高效表达及分离纯化研究]

【人IFN-γTNF-β融合蛋白在大肠杆菌的高效表达及分离纯化研究】.pdf浙江大学博士学位论文 人IFN-Y/TNF-β融合蛋白在大肠 杆菌的高效表达及分离纯化研究 StudyonHigh Level Expression andPurification of HumanIFN-/TNF-βFusionProteininE.coli 周 晴 导师:沈之荃院士、教授(浙江大学高分子系)张惟杰教授(上海交通大学生命科学学院)丁仁瑞教授(杭州大学生命科学学院)专业:高分子物理和化学 浙江大学 1997年11月浙江大学博士学位论文 参考文献附录 附录I附录I攻读博士学位期间发表的论文浙江大学博士学位论文 PP和cIts857温敏阻退蛋白基因外,还具有较强的核糖体结合位点(SD序列)和 EcoR1位点(插入位点)修饰成Xba1位点,使外源编码序列能够直接插入载体。质 粒中SD与ATG起始密码子之间相距10bp(内含XbaI位点)实验结果表明,新构 建的重组质粒pBXIL1转化受体菌E.colDH5a,经过42C诱导,IFN-Y突变体(IFN-y135-X14,18kD)表达量高达42 .在上述实验的基础上,将原YTNF-B重组基因3端所含TNF-β148编码序列的 片段切下,直接连接到pBXIL1内IFN-135-X13编码序列的3端,构建成vTNF-3 重组基因表达
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