【大鼠睾丸支持细胞培养方法及其在检测乙烯雌酚硫丹氯化镉雄性生殖毒性中的应用】.pdf

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DNA酶),震荡消化约50分钟,用80μm孔径的细胞筛过滤,PBS液冲洗,收集网上的曲细精管,加DMEM培养液,用吸管吹打使分散成支持细胞悬液.移入 96孔细胞培养板,分别在28℃、30℃、32℃、34℃、37℃、39℃、95 空气,5 CO2的细胞培养箱中培养,以选择支持细胞的最适培养温度.用台盼兰染色法测定支持细胞分别在培养0、1、2、3、4、6、8、10、12小时后的存活率,用MTT法测定在培养24、48、96小时后的支持细胞存活率.本研究用二步消化法分离支持细胞,每只28日龄雄性大鼠可获支持细胞约 6.

胞.蔬丹和己烯雌酚在动物体内实验均证明具有罐性生殖毒性,本实验采用翠丸支持细胞体外培养系统发现它们对支持细胞有毒作用,并具有很好的时间效应和剂量效应关系,体现了良好的体内外一致性.硫丹和己烯雌酚均具有雌激素样作用,在体外能引起雌激素敏感细胞MCF -7的大量增殖,本实验发现它们对支持细胞均具有毒作用．是否所有具有雌激素作用的毒物对支持细胞均有毒作用及其作用机理如何有待于进一步探讨,氯化镉在动物体内实验证实具有雄性生殖毒性,但其作用机理不甚明了.越来越多的证据表明睾丸组织中的支持细胞是最先受影响的细胞,它能损伤支持细胞间的间隙连接,从而增加大鼠血睾屏障的通透性.