【大麦黄花叶病毒BaYMV的检测及其在抗病遗传育种中的应用研究】.pdf

目录摘要一、前言二,材料和方法材料.二方法 1.病毒制剂制备 2病毒电镜观察及病毒含量计算 3.抗血清制备 4待测样品抗原制备 5.ISEM捕获法 6.ISEM捕获修饰法三。结果(一)病毒的提纯)抗血清效价回免疫吸附电技术 ISEM技术的建立/.

摘要本论文对三个BaYMV提纯程序之一进行了简化和改良。制备了抗血清。对工SEM的最适条件进行了研究.20 的蔗糖垫可有效地滤去悬液中的核酸,而10 的蔗糖垫不能有效地去悬液中的核酸.经12-24小时冻融处理后,6000rpn1离心15-20分钟,可除去悬液中的大部分残存蛋白质.进行ISEM的抗血清的最佳稀释度是1:500或1:1000,抗血清包被铜网最适时间是15.30分钟。把经抗血清包被铜网置于病叶提取液的最佳时间为12小时,ISEM灵敏度是病叶汁液稀释800-1600倍。

前言大麦黄花叶病毒(BaYMV)是一种对冬大麦的生长,发育和产量构成严重危害的病毒。目前还没有切实有效的化学药剂可以消灭或遇制它:对付BaYMV最实用最有效的办法款是培育对BaYMV具有抗据大麦在病國自然感染或人工接种感染BaYMV后是否表现病症来判断条件(气温、水份、光照等)的改变而出现波动,例如敏感植株早期感染病毒后如果环境条件不适宜于BaYMV生长繁殖,因而植株不表现病症,则会把敏感植株误判为抗性植株。另外,在病理研究中,观察病症的办法无法判定无病症植株是不带病毒还是“隐性带毒”,因此,直接检测大麦植株体内是否携带BaYMV是遗传育种和病理研究中不可少的基础工作,现在