【大麦和水稻胚性悬浮培养细胞的玻璃化超低温保存和植株再生】.pdf

大麦和水稻胚性悬浮培养细胞的玻璃化超低温保存和植株再生目录摘要前言材料和方法 1.胚性悬浮细胞系的建立 2.细胞玻璃化超低温保存的方法 3.恢复培养和植株再生 4.其他检测实验技术结果 1.大麦胚性悬浮细胞系的快速建立及其特性①胚性愈伤组织的诱导和胚性悬浮系的快速建立②大麦胚性愈伤组织的显微和超微结构③细胞系建立过程中的细胞学观察④悬浮细胞生活力的荧光显微检测 2.大麦胚性悬浮系的玻璃化法超低温保存和植株再生 3.水稻胚性悬浮系的玻璃化法超低温保存和植株再生 4.

1973年,Nag和Street用液氮超低温保存了胡罗卜悬浮培养细胞,化冻后恢复生长的细胞发育成体细胞胚1o1。这是植物培养细胞超低温保存的第一例成功报道。七十年代末,关于超低温保存植物材料的综述还不多r28,1313。从八十年代中期开始,出现了许多超低温保存植物材料的综述c2.1893.所有这些综述都指出,液氮超低温保存在长期性和不引起遗传改变这二方面具有独一无二的优点。从数量上讲,超低温保存的植物材料早已超过一百种13.从材料的类型上讲,主要包括花药、茎尖和幼胚,以及离体培养的愈伤组织,悬浮细胞和原生质体。

黑暗,摇床转速85.100转/分。开始时每隔3天换液一次,每次更换1/3.2/3的培养基。六周后,将已分散出来的小细胞团转移到250=1大瓶子中悬浮培养(加液体培养基30.40m1),用cC-2培养基每七天换液一次。换液时应注意细胞密度和旧培养基的一定比例.悬浮过程中,用01yapusBH-2显微镜的微分干涉相差附件镜检细胞质量.从悬浮开始后每周记录悬浮培养物的情况.水稽的胚性悬浮系取水稻中梗品系02428成熟种子,去尧得米粒。消毒后的米粒接种在LS培养基 c813外加2mg/L2/4-D上。1.2天后,从米粒切取胚,把胚的盾片向上接种在相同的培养基上。