【原生後体电融合物构建酵母多倍体及STA基因表达剂量将就初探】.pdf

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原生质体电融合构建酵母多倍体 及STA基因表达剂量效应初探 摘要 本文在探索酵母原生质体制备及电融合条件的基础上,应用原 生质体电融合技术,从糖化酵母(S.diastaticus)菌株5101一7C,5206-B,5301-14D及酿酒酵母(S.cerevisiae)菌株HU-TY-1A出 发,获得了STA基因纯合、理论倍性为2n,4n乃至8n的多倍体和2 XSTA1/2×STA3、2×STA2/2×STA3的杂合四倍体糖化酵母菌株,以及4×STA1/sta°,4×STA2/sta°的种间融合株,通过细胞体积 测定,细胞核染色,DNA含量测定,遗传稳定性及营养要求测定,GA活力测定,原生质体电融合构建酵母多倍体 及STA基因表达剂量效应初探 前言 Andrews和Gilliland[1]在1952年研究啤酒酿造业中的过薄(su一 perattenuation)现象时,发现并分离鉴定了一种新型酵母,这种 酵母不仅具备一般酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)直接利用 葡萄糖发酵产生酒清的能力,而且能将啤酒发酵液中高粘度的糊精 水解成葡萄糖而加以利用。该种酵母即为糖化酵母(Saccharomyces diastaticus),这一发现对后来酵母利用淀粉发酵的研究产生了极 其深远的影响。调控方式。这方面的研究在STA1和STA2上已有了一些较为深入的报 道[19～31]。而有关STA3的研究则较为少见。现在已知,STA基因 有着与一般真核生物结构基因相同的启动子构造,该启动子已成功 地用于融合基因(STA1/5LDcDNA,STA2/1aCz)的表达[2][27],说 明STA基因应有与一般真核生物结构基因相似的表达方式。STA基因 的表达除受到本身启动子的调控外,同时还受到若干其它核调节因 子在转录及转录后水平上的调控。