【几种物理因子对外源DNA导入酵母的作用】.pdf

目录摘要前言-快速大规模制备质粒DNA 完整酿酒酵母的电穿孔转化相同交配型的酵母菌株间的质粒DNA电转化超声波对转化酵母原生质体的作用石英砂旋涡振荡法转化酵母结语致谢英文摘要

前言 6000多年来,酿酒酵母(SaccharomycesCerevisiae)一直是人类用于酿酒和制作面包的主要生产菌株。它是已知最简单的真核生物之一,也是目前在细胞及分子水平上研究得最彻底的真核生物,现已成为遗传学家们的真核模型生物。四千多位分布在世界各地实验室的科学家正在对酵母的基因组进行测序,构建物理图谐,预计在96年即可完成,酵母的基因组是紧凑有效的,每2000个誠基对就可编码100多个氨基酸长度的蛋白质。现在已发现有许多基因与人类基因组有同源性。

快速大规模制备质粒DNA 质粒DNA是分子生物学实验所不可缺少的,它常被用于克登或亚克隆外源基因,以及用于测序及转化等等。质粒DNA的提取和纯化是分于克隆中常用的一种技术。微量制备质粒DNA技术已有多种C1-,由于不断改进,其消耗越来越低,步骤越来越简单,用时越来越短。现在最快的方法只离心一次,不超过 10分钟(大规模制备质粒DNA都是基于微盘制备的基础上的,如分子克隆手册上的三种方法1。还有在此基础上改进的其他方法””。他们都是步骤多,费时。