【大麦黄花叶病表型免疫品种植株带毒性检测及DAC-ELISA方法学研究】.pdf

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目 東录 摘要 英文摘要 前言 材料与方法(一)材料(二)方法．多抗血清制备.待测样品抗原制备,3.DAC-ELISA法.超薄切片及透射电镜观察 结果(一)病组织粗汁液DAC-ELISA检测系统的建立 1.抗血清及酶标抗体适宜浓度的确定 2.抗原包被条件的确定 ．用以制备粗汁液的缓冲液的确定.CC14加离心处理粗汁液对检测的影响 ．抗原包被液对检测的影响.．抗原包被时间和温度的确定,(二)DAC-ELISA检测系统的应用．129个表型免疫品种叶片带毒性检测．10个品种不同时期根、茎、叶带毒性检测,3.ABSTRACT Through improvingthe conditions for antigen coating,the present study establishedthe dircct antigen coating formof indirect ELISA(DAC-ELISA)forthedetcctionofBarleyYellow MosaicVirus(BaYMV)ininfcctcdtissucs of barlcy.检测效果差,且工作周期较长、工作量大。此外,也可用叶片汁液 负染法来检测病毒。但要在电镜下观察到一个病毒粒子,实际上每 很低的植株,应用此法在电镜下往往观察不到病毒粒子。目前,已 有二种灵敏度高而操作简便的方法被广泛地应用于植物病毒的检测:免疫电镜(IEM)法和酶联免疫吸附法(ELISA)。前者虽具有灵敏度高、它相对于后者而言存在着明显的缺陷,如一次性实验难以处理大批 样品.特别是对含病毒量很少的植株样品进行检测时,需观察较多 的视野,使工作量大增。因而在对大量样品进行BaYMV带毒性检测时,建立起一套相对快速高效的检测系统就显得十分重要。