【幽门螺杆菌的PCR检测研究】.pdf

目录摘要.英文摘要前言材料与方法一、材料.细菌菌株 2.临床标本 3.引物合成 4.扩增仪二、方法 1.细菌DNA制备 2.标本DNA制备 3.引物浓度测定 4.PCR反应 5.高浓度镁离子的PCR反应 6.产物分析和鉴定结果.一、HPDNAUreA基因、16SrRNA基因的PCR扩增、PCR的敏感性和特异性,1.PCR的敏感性 2.PCR的特异性三、PCR反应参数的优化.引物浓度测定 2.PCR缓冲系统中Mg+对PCR反应的影响 3.三种裂解方法比较四、PCR检测胃活检标本.讨论一、PCR参数的优化和应用二、HP几种检测手段的探讨.

ABSTRACT Apolymerase chain reaction(PCR) forthespecific detection ofHelicobacterpyloriwasdevelopedwithtwo singleprimerpairderivedfromthenucleotidesequenceof the Urease A gene and the 16S rRNA gene of H.pylori.We respectivelyachieved specific amplification of 411-bpand 139-bp DNA fragmentinH.pylori.

例如细菌培养法,组织学检查法为较原始的方法,特异性强,但敏感性不高,而且HP在合成培养基上很难生长,一般需3-7天的培养 [19,20]。尿素酶试验或尿素呼吸试验的检测方法虽然简单,但假阳性,假阴性比例较高[7,尿素呼吸试验还要用到同位素。血清学试验是一种抗原抗体反应,HP的侵入,人体的免疫系统产生应答,体液免疫中会产生一些特异性的IgA、IgG、IgM抗体,此法就是检测这些特异的抗体[22]。以前由于交叉反应降低了它检测的特异性,现在市面上可购得的抗HPIgG的试剂盒,提高了检测的特异性,且又方便,如今此法也作为HP检测的常规方法,其敏感性、特异性可达到94 、