【水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关候选基因的mRNA差别显示分析】.pdf

单位代号:研究生学号:水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关候选基因的mRNA差别显示分析论文评阅人:(姓名、职称、单位) 答辩委员会:(姓名、职称、单位)主席:成员:论文答辩日期

目录摘要前言 1、植物和病原物互作系统和植物抗病性基因 2、水稻抗瘟性研究,3、mRNA差别显示的原理和方法材料和方法1、材料、主要生化试剂、酶及缓冲液2、方法实验结果和分析,1、近等基因系H7R和H7S的抗感表型鉴定及抗性谱测定 2、水稻总RNA的抽提及浓度和纯度鉴定3、DD-PCR扩增筛选差异cDNA片段4、PCR重扩增DDcDNA片段 5、反向Northern重筛差异cDNA片段 6、反向Nonthem片段的克隆及鉴定 7、重组子外源片段的序列测定 8、Northern杂交讨论

摘要本研究利用-一对抗瘟性近等基因系(Near-isogeniclinesNILs)水稻 H7R(抗病)和H7S(感病)为材料,采用mRNA差别显示(mRNA differentialdisplay,简称DD)的方法,研究水稻早期经病原菌诱导后的基因表达情况,获得了一些阶段性结果,为进一步的工作打下基础.H7R和H7S水稻四叶期喷稻瘟病菌小种ZB15分生孢子,以喷水为阴性对照,分8h、12h、16h、24h等不同接种时间取样提取水稻总RNA.经220-300nm的RNA吸收值扫描和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳,结果表明我们所提取的RNA纯度和质量都较好,适合后续的DD分析。