[油菜叶绿体DNA在大肠杆菌中克隆及SalISmaI物理图谱制作]

【油菜叶绿体DNA在大肠杆菌中克隆及SalISmaI物理图谱制作】.pdf油茶叶绿体DNA在大肠杆菌 中的克隆及其SalI/SmaI 物理图谱的制作 厉玲(杭卅大学生物系)我们用普通离心机的差速离心,分离了甘 蓝型油莱(Brassicanapus)九=13系的叶绿体,并 以苯酚一氯仿及 RNase处理,纯化了叶绿体的 DNA。经BanHI、EcoRI、HindⅢ、SalI5SmaI五种 限制性核酸内切酶酶解、电泳分析,估娇出该 环状叶绿体DNA分子周长约为140kbp,即分子 量为 92×道尔顿。采用低熔点琼凝胶电 泳比段回收法,制作 了 该叶 绿体 DNA 的 Sal(I/SmaI 物理图谱。LScR CtDNA IRS IRS SScR rRNA基因与少数πRNA基因位于IRS之中,大多 数πRWA基因和编码蛋白质、酶的基因位于两尔 单贝区中。现已确定的tDNA编码的蛋白质、酶有:与固定 CO2 有关的 RuBPCaxe 大亚基[17 z];与电 素于22].ATPase 的 d.B、E亚基 3.延长因子 G 5 一兰蛋白质。但这兰还远未达到预浏的比DNA 编码能力。人们正对在cDMA上发现新的蛋白质 编码基因宁生浓厚兴趣。ctDNA分子中的位置。业面所说的、几手所有的 ctDNA基因,都是采用了这一枝术定位的。[72另 外,有了这一枝术,加之以克隆序2你,我们 还可以探知新的因或耐究新的植物材料.新近,对ctDNA上的启幼子(promo+er)与终业 细菌质粒的相似,使人们对核外细胞器差因表 这调控有了新的认识。这种相似,也激起了人 们以叶绿体DNA岁载体,进行高等植物遗传工 程的共趣。日本科学家正试把来自 P3R322 质 粒的大肠杆菌启子,一了pkc7粒的卡那需 素抗性林记和一了含有二了复制起始点的也钱 叶绿体DNA重组在一起,作岁一种更理想的把 可见,把叶绿体DNA作为高等植物遗传工程的 总之,在不久的
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