【新酵母质位的分离和鉴定及与pBR322的杂种质粒在Ecoci中的克隆】.pdf

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目录 一.摘要 二.前言 三.材料和方法 四.结果(一)从啤酒酵母2中筛选到质粒DNA及其电泳 鉴定12 二新质粒的酶切图谱分析!4 三新质粒的电镜观察 四)新质粒的分子量测定(五杂种质粒的构建及在E.Co心中的表达1 六影响 2 μm DNA 得率的 n.因素2(五讨论(pSCH;是有别于以前报道的新酵母质粒 pSCH;质粒的结构(三)所构建的杂种质粒可作为穿梭质粒载体?(四)影响酵母质粒得率的几个因素初2(六参考文献.七.前 言 母菌的研究已有了许多年历史,它是重 要的工业微生物,又是具有真核生物生物学特 性的单细胞低等真核生物,它的染色体遗传图 发展,文被广泛运用于分子遗传学研究(5]。酵 母用作分子克隆研究,具有许多优点:能在 简单合成培养基上生长,也易制成感受态,吸 非致病性,对人畜无害;质粒和噬菌体 方面的工作;其分子克隆是研究真核生物基 因表达与调控的理想材料。人们在研究酵母基 因克隆时岁现,2μmDNA质粒是个很好的载体 几年也取得了许多重大进展.自SinclaiJ.H.胞中的表达机理;在实际应用中可作为塘育之 业微生物良种的手段。所以,在前人工作的基 础上,我们做了一些这方面的工作.我们在n株酵母菌中进行了质粒DNA的检 测和纯化2作,并用其中一种2μmONA分子进 行酶切分析和电镜观察,构建了此质粒与pBR32 的嵌合质粒,然后转化到E.coC6o中,进行功 能表达,检測分析。证实它是有别于前人报道 的另一新的2-从mDNA质粒.材料与方法(一)菌蛛:所用的菌株为啤酒酵母和大肠杆菌。见表1.表,实验菌株 菌株 赤源 菌株 来源 Saccharomycls Sacclavome.ccs 复且大学遗传研究所 中科院微生物研究所 cirevisiae.
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