【啤酒酵母α-GPD变异的分离鉴定遗传及高渗数感性的分析】.pdf
酒酵母α-GPD变异的分离,鉴定,遗传及高渗敏感性的分析 摘要 分离到一株α-甘油磷酸脱氢酶(α-GPD)突变,的活性比野生型菌株低约与倍。遗传分 祈表明,α一GPD变异是由单结构基因突变引起的,它影响酶分子的结构,可能使单体酶不能形成 正常的二聚体.这一一GPD变异裸同时也是高敏感菌株,在高培养条件下不能正常生长,在高条伴 下的呼吸能力和发能力比野生型菌株低很多.太文对啤酒醒母的α不一GPD活性和高渗敬感性的关 条进行了讨论.本实验在导师陈士怡先生的指导下进行,將此表示裳心的感谢!
材料和方法 一.茴滕 菌林(Saccharomyes cerevisiae) 倍性及支列型 来源 81-9H<1> 1-91H n<1> LISH 2n<2> A364A n(a)<3> 2-1c n(a)<4> 2-1C n<4> K 2n<5>.由中科院微生物所苗神室提供。<2>.由H516-15与 H516-1 杂交而成。<3)由中科院上海细胞所提供.由中科院微生物.所苗种室提供的2和 群剖分离。<5>龙州长征化工厂生产菌棘.二.
28℃摇床培养,定时取样,用型分光光度汁 测定语养物的光密度(640nm处的oD值)四.电泳分新 群品在聚丙烯碗胺凝肢中进行包泳分析,电泳系统采用Tnis一甘氨够系统.收集培养悬记中的菌体细脆1克,与1 m 缘冲液(0MTris-0M甘氨,蔗新12 .,B一 疏基乙醇M,PH7)混合,置子研钵中,加 入少许石英砂,在冰浴中研成匀浆,400转/分离 心20分钟,取上清海电泳,并以溴酚兰为指示 剂.分离胶:丙烯酰胺7 ,甲叉双丙烯胺。1 TEMED 0 ,过硫酸铵05 ,375 mMTris-HCl,PH.浓缩胶:丙烯酰胺3 ,甲又双雨烯磁胺.