【青黴素珗化□基因部分結構分析】杭州大學.pdf
目录 摘 要 一前言 二材料和方法 三结果和讨论
前 1950年。Sakaguchi和Murao报道,在产黄 青霉(Penicilliumchrysogenun)和米曲霉(Aspergillusoryzae)中存在一种酶,它能水解青霉素G 成为苯乙酸和6-APA(6-aminopenicillanicacid)(2,3)CH2-CO2H+H2N-CH-CH CO一N CH-CO2H 这种酶就是青霉素酰化酶(penicilliaacylase),筒 称PAa 由于6一APA生产半合成青霉素的重要性加速了青霉素 酰化酶的研究和应用的发展。
水解青霉素G时受到CagZ 或F的抑制。反应产物对酶也有微弱的抑制,苯乙酸是竟争性抑 制剂,Ki为O2mM,6一APA是非党争性抑制剂,Ki为 1。5mM。等尔的苯甲磺酰氟不可逆地抑制这个酶,二异丙基 磷酰氟对酶仅有微弱的抑。酶水解青霉素G的最适PH为81 左右。其Km为002mM:反应的最运温度为54 C。在较底PH时,许多细菌产生的青霉亲酰化酶,可催化水解反应 的逆过程.1979年,有人克隆了来自大肠杆菌ATCC11105的青霉 素酰化酶结构基因,并达到了表达。作为基因工程产物的 酶也能水解青霉素G成6一APA。