【柞蚕蛹溶菌□的分离和提取】罗立新.pdf
摘 要 本文报道了热空气处理,大肠杆菌KD3诱导柞蚕蛹血淋巴 的方法,热空气处理以50℃.处理30分钟后,放置在25℃.相对湿度为60.80 的生化培养箱内培养48小时,溶菌酶活 力提高了6.10倍.大肠杆菌K2D:调制成2×10个/m1 的浓度,每蛹注射50u1,放置在25℃的培养箱中培养5天．溶 菌酶活力提高了10～20倍。比较热空气处理和大肠杆菌诱导的 方法,从生产的角度出发,以热空气处理较为实用.利用溶菌酶在酸性条件下对热的稳定性和与杂质蛋白等电点的差异,采用PH40,60C水溶加热5和PH8等电点沉淀的步骤,去除掉部份杂蛋白.
目录 摘要.前言 材料 方法 结果 一、柞蚕蛹溶菌酶的诱导方法 二、选择性热变性 三、DEAE一纤维素柱层析条件 四、CC一纤维素亲和层析条件 五、柞蚕蛹溶菌酶的诱导和提纯 六、柞蚕蛹溶菌酶的纯化路线 七、中试结果.讨论.一、原料的处理 二、柞蚕蛹的诱导方法 三、柞蚕蛹溶菌酶的提纯 四,生产应用的可能性 总结
射测定溶菌酶的分子量为14000～15000.等电点为 PH107.113,最适PH值为65左右、用X一射线衍射 测得此酶的体积为45×30×30A,溶菌酶的结晶形状呈梭状 晶体,如图1所示,图2表 示溶菌酶是由多种氨基酸借 [54] 助肽键连结而成的螺旋体 它有四对二硫键。有人从溶 菌酶的分子中分离到20个 氨基酸构成的环多肽,即第 图1、鸡蛋白溶菌酶结晶 64至83号的氨基酸顺序(放大95倍)的多肽。这种多肽是溶菌酶 特异的抗原性决定簇,既能 与溶菌酶抗体结合,又能使 机体产生免疫特异性抗体:溶菌酶是一种化学性质颇为 稳定的蛋白。当PH值在 1。2.11范围内时。