【高效液相色谱法纯化蛋白质理论与技术】郭立安陕西科学技术.pdf

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高效液相色谱法 纯化蛋白质理论与技术 第四军医大学唐都医院 郭立安编著序 生物大分子的分离和纯化是伴随生命科学的发展而兴起的一 门新学科。它专门研究分子量大于10000,具有生物活性的物质 在空间迁移和再分配过程中的微观(分子构形)和宏观(热力 学)变化,是现代科学中最活跃的一个分支.从现代分离科学理论的计算得出,色谱和电泳是目前所知的 分离效果最佳的两种方法。因电泳法在用于生产规模上的困难,高 效液相色谱就成为实验室和工业生产上分离和纯化生物大分子的 最有效和最常用的方法。某些天然或基因工程生产的治疗蛋白的 价格高达千万元/克,其主要原因是分离和纯化的消耗要占总成本 的60一90。可想而知,掌握和熟练地运用制备色谱技术,可以 大大降低生产成本。前言 近年来,高效液相色谱(HPLC)已成为分离纯化蛋白质非常有 效的方法之一。其主要原因为:①HPLC纯化蛋白质的速度快,一 般半小时左右就可进行一次分离,大大缩短了纯化蛋白质的时间.②分离效果好,10cm或5cm长的HPLC柱子便可使十几种以上的 蛋白质得到有效的分离,而且这种分离效果是其它纯化方法如盐 折法、有机溶剂沉淀法、超滤法以及经典柱液相色谱法所无法比拟 的.③适用性强,几平所有的蛋白质根据其物理性质(等电点、疏水 性、分子量等)的不同,都可使用HPLC进行分离。除此之外,HPLC 还有回收率高,处理量大等优点。