[人丙酮酸脱氢结构与研究及□库技术筛选多□类亲和层析配体]方锐

【人丙酮酸脱氢结构与研究及□库技术筛选多□类亲和层析配体】方锐.pdf分类号:0631 密级:内部 人丙酮酸脱氢酶结构与功能研究 及 肽库技术筛选多肽类亲和层析配体 方锐 指导教师:李惟教授吉林大学生命科学院 Dr.R.G.Duggleby澳大利亚昆士兰大学生物化学系 专业:高分子化学与物理 研究方向:蛋白质与多肽化学 论文答辩日期:1999.提要 本论文的工作由两部分组成:第一部分,人丙酮酸脱氢酶 的结构与功能的研究.第二部分,利用肽库技术筛选α一干扰 素亲和层析配体。在第一部分工作中,采用定点突变方法对人 丙酮酸脱氢酶的活性中心进行了研究,突变位点的选择基于大 量的生物信息学的研究。实验结果表明,人丙酮酸脱氢酶的β 亚基第89位谷氨酸是直接参与催化及与辅基焦磷酸硫胺素结 合的残基。在第二部分工作中,利用了噬菌体展示肽库技术筛 选α一干扰素亲和性肽配体。通过对筛选结果的分析和所筛到 的小肽序列的同源性比较,合成了两个六肽,并将其固定在磁 性载体上制备成亲和层析介质。CONTENT PARTONE:STRUCTUREANDFUNCTIONOFHUMANPYRUVATE DEHYDROGENASE CHAPTERIINTRODUCTIONGENERALINTRODUCTIONOFTHE2-OXOACIDDEHYDROGENASEFANILY 1GENERALINTRODUCTIONOFPYRUVATEDEHYDROGENASECOMPLEX 1REACTIONANDCOMPOSITION 1REGULATIONBYREVERSEPHOSPHORYLATIONOFPYRUVATEDEHYDROGENASE 1.
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