【古细菌AeropyrumpernixK1超嗜热酯□乙□氨□水解□的研究】高仁钧.pdf

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密级:内部交流 吉林大学 吉林大学 古细菌AeropyrumpernixK1超嗜热酯酶/乙酰氨肽水解酶的研究 Studyofesterase/AAREfromArchaeonAeropyrumpernixK1 高仁钧 曹淑桂教授 冯雁教授 生物化学与分子生物学 二〇〇三年十二月十二日 朱平教授 罗贵民张玉静教授 二〇〇二年十二月十四H 指导教师:专业名称:论文答辩日期 授予学位日期 答辩委员会主席:论文评阅人:类号:Q55作名:品均 提要 本文根据遗传信息,通过生物信息学方法进行分析、确定研究古细 道eroprumpernixK1中的酯酶!乙酰氨肤酶基因.我们从培养古细菌出 发,通过提取基因组DNA,设计PCR引物、再经过PCR反应,克隆出 APE1547基因、再将其插入表达质粒pET11a和pET15b,构建工程菌,发酵产酶,通过热变性,HitrapQSepharose离子交换柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析获符了电泳纯的超嗜热酯酶APE.APE分子量为 63KDa左右,非变性电泳及活力染色电泳确定其为单聚体蛋白。APE的 酶学性质研究表明该酶的最适温度为90℃,最适pH为8。作者:高仁 1 3 5> 7 8-18 -19-21 -21 -22 -23 -24 -24 -25 -27-30-31 录 吉林大学等士学位毕业论义 目 第一章前言 1嗜热古细菌简介 1古细菌嗜热古细菌- 1嗜热古细菌的耐热机制- 1嗜热酶.嗜热酶简介 1嗜热酶的应用- 1嗜热酶的耐热机制- 1疏水作用- 1氨基酸组成和内在的倾向 1二硫键- 1芳香作用- 1氢键-.
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