[活性氧对固氮□钼铁蛋白损伤的初步研究]赵云峰

【活性氧对固氮□钼铁蛋白损伤的初步研究】赵云峰.pdf活性氧对固氮酶(钼铁蛋白)损伤的初步研究 专业:生物化学 赵云峰 指导教师:林永齐(教授)一九九四年四月授要 棕色固氮酶(钼铁蛋白)含有三种金属原子簇.FeMo-co、P-cluster和2Fe(S)簇,它们都可能参与蛋白分子内的电子转移和起稳定蛋白质结构的作用,另外,FeMo-co还被证明是催化活性的重要部位.我们的实验结果表明,活性 氧(HOO、OH)能使这些金属原子簇上的Mc、Fe发生脱落,MoFe蛋白的 活力随之下降,可见吸收光谱、紫外CD谱,荧光光谱和凝胶电泳实验表明这 种MoFe蛋白结构发生很大变化 H2O2处理的MoFe蛋白经G-25柱层析得到两个洗脱峰,峰1的活力下 降90 ,2峰几乎无活力,后者的α螺旋度只有5 .氮能力年Schneider及Burris等从蓝藻中获得月有柜当恒定固氨能力 下通过自溶获得粗酶液,后者在高含量的丙酮酸及其他反应底物存在下能很 好固氮,由于该方法重现性好、酶活性高,很快被泛采用,这在生物固氮研 究史上是一个重要的转折点,从此研究进入了无细胞水平时期,1964年Hardy等2证明生物固氮必须有ATP参加.后来Moustafa等[13] 进一步指出ATP酶解生成的ADP是固氮反应的抑制剂.Bulen等1采用 ATP发生系统(肌酸磷酸和肌酸激酶相互关系及少量ATP)提供固氮反应中 所需的能量,避免了因ATP积累所产生的抑制效果 1965年Bulen等[i5发现在离体实验
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