【人血管内皮生长因子VEGF165cDNA的高效分泌型表达纯化及其生物学的活性的研究】尹一子.pdf

吉林大学硕上学位论文人血管内皮生长因子(VEGF)cDNA的高效分泌型表达、纯化及其生物学活性的研究作者:尹一子指导教师:李惟教授专业:生物化学与分子生物学单位:吉林大学生命科学院完成时间:2000年5月25日

提要血管内皮生长因子(VEGF)具有促进血管内皮细胞增殖的作用,而促进血管生成对于治疗组织性缺血,特别是保护缺血心肌、维护心脏功能具有决定性的作用.VEGFss是血管内皮生长因子中的一种主要存在形式,通过基因工程的方法实现VEGFs的高效表达并获得具有生物学活性的重组蛋白对于治疗冠心病等心脏疾病具有十分重要的意义.本研究采用酵母Pichia.pastoris表达系统,实现了VEGF165的高效分泌型表达,并对表达产物进行了初步纯化,采用细胞生物学的方法对纯化后的重组VEGF的生物学活性进行了研究.研究表明,通过Pichia.

已被用于冠心病防治的实验研究。研究发现它可促进小冠状血管侧枝循环的建立,恢复心肌血流供应,减少梗塞面积,促进缺血心肌的功能恢复,而且对实验性动脉成形术后再狭窄也具有很好的防治作用,因此,研制开发重组VEGF对于缺血性心脏病及其它组织缺血性疾病的防治具有重大的应用价值.在VEGF研究方面,目前我国己有儿个实验室成功地在大肠杆菌中表达了hVEGF,但均以融合蛋白形式表达,目的是制备hVEGF抗原,未对其生物学活性进行系统研究,也未见重组hVEGF纯化成功的报道.VEGF由于天然来源非常有限,产量甚微,远不能满足临床应用的需要,因此利用DNA重组技术大量生产VEGF势在必行。