[人血管内皮生长因子VEGF165cDNA的高效分泌型表达纯化及其生物学的活性的研究]尹一子

【人血管内皮生长因子VEGF165cDNA的高效分泌型表达纯化及其生物学的活性的研究】尹一子.pdf吉林大学硕上学位论文 人血管内皮生长因子(VEGF)cDNA的高效 分泌型表达、纯化及其生物学活性的研究 作 者:尹一子 指导教师:李惟教授 专 业:生物化学与分子生物学 单 位:吉林大学生命科学院 完成时间:2000年5月25日提要 血管内皮生长因子(VEGF)具有促进血管内皮细胞增殖的作用,而促进血管生成对于治疗组织性缺血,特别是保护缺血心肌、维护心脏 功能具有决定性的作用.VEGFss是血管内皮生长因子中的一种主要存在形式,通过基因工程 的方法实现VEGFs的高效表达并获得具有生物学活性的重组蛋白对于 治疗冠心病等心脏疾病具有十分重要的意义.本研究采用酵母Pichia.pastoris表达系统,实现了VEGF165的高效 分泌型表达,并对表达产物进行了初步纯化,采用细胞生物学的方法对 纯化后的重组VEGF的生物学活性进行了研究.研究表明,通过Pichia.已被用于冠心病防治的实验研究。研究发现它可促进小冠状血管侧枝循 环的建立,恢复心肌血流供应,减少梗塞面积,促进缺血心肌的功能恢 复,而且对实验性动脉成形术后再狭窄也具有很好的防治作用,因此,研制开发重组VEGF对于缺血性心脏病及其它组织缺血性疾病的防治具 有重大的应用价值.在VEGF研究方面,目前我国己有儿个实验室成功地在大肠杆菌中 表达了hVEGF,但均以融合蛋白形式表达,目的是制备hVEGF抗原,未对其生物学活性进行系统研究,也未见重组hVEGF纯化成功的报道.VEGF由于天然来源非常有限,产量甚微,远不能满足临床应用的需要,因此利用DNA重组技术大量生产VEGF势在必行。
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