【成纤维细胞生长因子受体1的克龙表达坚定和生物学活性研究】孙铭一.pdf

目英文缩写词表前实验材料和方法一、细胞培养 h 二、人FGFR1的克隆三、人FGFRI的次级克隆四、人重组FGFR1的表达与鉴定五、利用噬菌体肽库进行亲和筛选实验结果一、3T3细胞表达人FGFR1 21 二、昆虫细胞表达人FGFR1 三、酵母细胞表达人FGFR1 四、筛选人FGFR1的亲和性噬菌体讨小结参考文献个人简历.

前言一、FGFR1的结构、功能及与疾病的关系成纤维细胞生长因子受体(Fibroblastgrowthfactorreceptor,FGFRs)是一个多基因家族,属于免疫球蛋白基因家族成员。目前已确定了四种由独立基因编码的人FGFRS,即FGFR1、FGFR2、FGFR3和 FGFR4。FGFR1是一种跨膜蛋白质,属于受体酪氨酸激酶,由三个主要部分组成:即细胞外段、跨膜区和细胞内段,细胞外段是配体成纤维细胞生长因子(Fibroblastgrowthfactor,FGFs)的结合区。FGFs也是一个多基因家族,现已有19个成员,即FGF1-FGF19。

质粒载体和昆虫杆状病毒基因组共同转染昆虫细胞,通过体内同源重组,外源基因插入到病毒粒子的基因组上,.般情况下,重组率为0 -1 .因为外源基因插入到重组病毒的多角体蛋白基因位点,使这个基因不能表达,所以这个病毒没有包含体蛋白外壳,可以通过判断噬菌斑是否由缺少包含体的病毒形成米鉴别重组病毒。但这种包含体缺失的噬菌斑表现型在99 野生型病毒的背景下是不易区分的,所以鉴别并纯化重组病毒需要几个月来完成.最近研究发展了一种快速有效的构建重组baculoviruses的方法(Luckowetal)(fig1)。