[大肠杆菌操纵元otsBA的定向进化研究]刘洋

【大肠杆菌操纵元otsBA的定向进化研究】刘洋.pdf吉林大学硕士学位论文 Master s thesis of Jilin University 大肠杆菌操纵元otsBA的定向进化研究 StudyofDirectedEvolutionforOperonotsBAfromE.coli 作者 刘洋 Author LIU Yang 专业名称 生物化学 Major Biochemistry 指导教师 张今 教授 Advisor ZHANGJin,Professor 分子酶学工程教育部重点实验室 Laboratoryof MolecularEnzymologyandEngineering 2000年5月 May,2000目 吉林大学硕士学位论文 目录 提要 1.前言 1海藻糖简介 1海藻糖代谢的主要途经 1基因改造的主要方式 1定向进化的原理和发展现状 1协同进化(Co-evolution)的概念 1杂合进化(Hybrid-evolution)的概念 1E.coli操纵元otsBA的定向进化 2.实验材料2主要仪器 2菌种 2培养基 2质粒 2试剂 2溶液 2计算机辅助设计工具 3.实验方法 3菌种的培养和保存 3常规分子生物学方法 3菌体海藻糖的提取 3.提要 吉林大学硕士学位论文 提要 海藻糖(Trehalose,α-D-glycopyranosyl-α-D-glycopyranoside),是一种 非还原性二糖。近年来因其对生物大分子的非特异性的保护作用而倍受人 们关注。海藻糖-6-磷酸合成酶/海藻糖-6-磷酸水解酶酶系催化大多数微生 物体内海藻糖的合成。在大肠杆菌(E.coli)中,该酶系由位于基因组42min 的操纵元(operon)otsBA编码。该操纵元全长2kb,基因otsB位于上游编 码海藻糖-6-磷酸水解酶,而基因otsA位于otsB下游编码海藻糖-6-磷酸合 成酶。二者间有23nt的重叠。
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