【乳癌抗原提取和特异性免疫治疗的研究】单征.pdf

摘要为提取高效的乳癌抗原,并通过加工激活CTL,使机体的免疫系统产生特异性免疫应答,本文通过应用磷酸一柠檬酸的温和酸洗法,直接从细胞膜上洗脱天然抗原肽,经过Sephadex-G25和反相高压液相色谱(HPLC)分离,与所诱导的DC共育,使抗原多肽得到进一步的加工和提呈,直接进行免疫治疗或激活CTL细胞达到间接免疫治疗.结果显示,经上述方法提取的肿瘤多肽,使机体淋巴细胞转化增高,移植肿瘤生长缓慢,与对照组比较出现通计学差异(PZ0).提取的肿瘤多肽能使CTL对肿瘤细胞特异性杀伤活性提高.DC.体外与抗原多肽共同培养后回输50天时可以提高荷瘤小鼠生存率50。

乳癌抗原提取和特异性免疫治疗的研究前言近年来,由于已证实的人类肿瘤特异性抗原及一些癌基因蛋白抗原的相继发现给了人们极大的鼓舞,并在该领域研究的基础上逐步发现了大量的肿瘤相关抗原,各种形式的肿瘤疫苗得到分离、提取或人工合成。肿瘤原性低和具有抗原调变能力,缺乏共刺激信号,使肿瘤自身作为抗原提呈细胞(APC)发挥作用时,肿瘤抗原不能得到有效的提呈。T细胞介导的免疫应答不能被有效激活,甚至导致T细胞失能,因此改变、促进机体免疫系统加强对肿瘤抗原的提呈和识别,并激活相应的效应细胞,成为肿瘤免疫治疗中具有实用价值的研究方向之一。

材料与方法研究对象:小鼠:纯系京白2号雌性鼠(天津肿瘤研究所分子生物室).小鼠乳癌细胞株:MA737(天津肿瘤研究所分子生物室).人乳癌细胞株:MCF-7(天津肿瘤研究所分子生物室)试剂:1、葡聚糖凝胶G-25(SepbadexG-25)2、RPMI1640培养粉 3、淋巴细胞(Percoll)分离液(美国Sigma公司)4、小牛血清(FCS)(大连生物所)5、IL-2(上海生物制品研究所)6、H-TdR(北京原子能研究所)7、刀豆蛋白(ConA)(美国Sigma公司)8、胰蛋白酶(美国Sigma公司)9、IL-,(美国PE公司)10、hGM-CSF(北京邦定公司)