【小鼠SCF基因克隆坚定及其在骨髓细胞和脐血细胞中的表达】张红梅长春.pdf

本论文是在导师朱迅教授的精心指导 下完成的。在三年学习期间,我的导师给 予了我悉心的指导、殷切教诲,便我得以 顺利完成博士研究生的学习任务。导师渊 博的学识、严谨的科学态度和科学作风使 我受益匪浅。我愿借此机会,向我尊敬的 导师由裹的敬意并致以深深的谢慧!
二、目的基因导向、高效地导入宿主 三、提高转染基因在体内的表达水平 一、小鼠SCFcDNA克隆及序列分析 二、SCF基因在大肠杆菌中的表达 三、SCF基因在COS一7细胞和CHO细胞中的表达 四、SCF基因在骨髓细胞中的表达 五、SCF基因在脐血细胞中的表达 六、SCF基因在其他细胞系的表达 一、SCF基因的克隆和测序 二、SCF基因在大肠杆菌中的表达 三、SCF基因在COS一7和CHO细胞中的表达 四
1.SCF基因克隆及测序:根据小鼠SCFcDNA膜外段序列没计合成 了对特异引物,应用PCR技术,从pRC/CMV(含小鼠SCFcDNA)质 粒上钓取SCFcDNA,进行TA克隆,通过测序确证克降基因的三确 性,为重组DNA表达体系的建立和基因的表达研究打下基础.2.SCF基因在大肠杆菌中的表达:构建原核表达载体pBV220 SCF、PQE30-SCF,在大肠杆菌中诱导表达,并分析其表达量。初提表 3.SCF基因在COS-7和CHO细胞中的表达:首先构建真核表 达载体pcDNA3一SCF。 