[乳癌抗原提取和特异性免疫治疗的研究]单征

【乳癌抗原提取和特异性免疫治疗的研究】单征.pdf摘要 为提取高效的乳癌抗原,并通过加工激活CTL,使机体的免疫系 统产生特异性免疫应答,本文通过应用磷酸一柠橡酸的温和酸洗法,直接从细胞膜上洗脱天然抗原肽,经过Sephadex-G25和反相高压液相 色谱(HPLC)分离,与所诱导的DC共育,使抗原多肽得到进一步的 加工和提呈,直接进行免疫治疗或激活CTL细胞达到间接免疫治疗.结果显示,经上述方法提取的肿瘤多肽,使机体淋巴细胞转化增高,移植肿瘤生长缓慢,与对照组比较出现通计学差异(PZ0).提取 的肿瘤多肽能使CTL对肿瘤细胞特异性杀伤活性提高.DC体外与抗 原多肽共同培养后回输50天时可以提高荷瘤小鼠生存率50。乳癌抗原提取和特异性免疫治疗的研究 前言 近年来,由于已证实的人类肿瘤特异性抗原及一些癌基因蛋白抗原的 相继发现给了人们极大的鼓舞、并在该领域研究的基础上逐步发现了大量 的肿瘤相关抗原,各种形式的肿瘤疫苗得到分离、提取或人工合成。肿瘤 的发生和发展,主要在于其产生对机体的免疫逃逸机制,肿瘤细胞的免疫 原性低和具有抗原调变能力、缺乏共刺激信号、使肿瘤自身作为抗原提呈 细胞(APC)发挥作用时I!,肿瘤抗原不能得到有效的提呈。T细胞介导的 免疫应答不能被有效激活,甚至导致T细胞失能、因此改变、促进机体免 疫系统加强对肿瘤抗原的提呈和识别、并激活相应的效应细胞、成为肿瘤 免疫治疗中具有实用价值的研究材料与方法 研究对象:小鼠:纯系京白2号雌性鼠(天津肿瘤研究所分子生物室).小鼠乳癌细胞株:MA737(天津肿瘤研究所分子生物室)人乳癌细胞株:MCF-7(天津肿瘤研究所分子生物室)试剂:1、葡聚糖凝胶G-25(SepbadexG-25)2、RPMI1640培养粉 3、淋巴细胞(Percoll)分离液(美国Sigma公司)4、小牛血清(FCS)(大连生物所)5、IL-(上海生物制品研究所)6、H-TdR(北京原子能研究所)7、刀豆蛋白(ConA)(美国Sigma公司)8、胰蛋白酶(美国Sigma公司)9、IL-:(美国PE公司)10、hGM-CSF(北京邦定公司)仪
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