【重组人肝细胞生长因子生物化学研究】吕文富.pdf
谨以此论文首页献给尊敬的导师颜炜群教授:他的言传身教使我对研究工作充满信心并感到兴 趣蛊然.他的夜以继日、忘我投入的工作精神令 我感怀并充满深深的敬意.他的理性和卓越的工 作能力、他的正直品格和对生活的热枕更是我今 后人生的楷模。
英文缩写词表 1.AcMNPVAutographa californica nuclearpolyhedrosis virus,Baculovirus 2.Sf9 Spodopteerafrugiperda 3.rhHGF 重组人肝细胞生长因子 4.AF-heparin 肝素亲和层析柱 5.FPLC 蛋白快速分离液相色谱 6.SDS-PAGE 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 7.NBCS 新生小牛血清 8.Collegenase 胶原酶 9.MTT 噻唑蓝 10.OD 光密度 11.CC1,四氯化碳 12.IP 经腹膜腔 1:3.SGPT 血清谷丙转氨酶 1.
中文摘要 我们从人肝组织克隆HGFcDNA,建立了AcMNPV/hHGF- 15/S9昆虫细胞表达体系,进行了重组人肝细胞生长因子 的表达研究,获得了5mg/儿的稳定的表达产量。本文在此 基础上进行了rhHGF的纯化研究,通过肝素亲和层析和 MonoS离子交换层析的连续分离,获得了高纯度的rhHGF(98),在还原条件下,经SDS-PAGE证实,为分子量60KD 的成熟型分子,大亚基为69KD,小亚基为34KD。纯化的 rhHGF在2ng/m1即具有促进原代培养的成龄大鼠肝细 胞增殖的活性,6ng/ml时作用最强。