【复合聚合□链式反应检测腹膜透出液中的金黄色葡萄球菌和白色念珠菌】卢雪红.pdf

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在三年的学习和生活中,我的 导师苗里宁副教授给予我悉心的指 导和殷切的教诲,使我顺利地完成 硕士研究生的论文工作,我借此机 会,向我的导师表示由衷的敬意,并致以深深的谢意。本研究根据聚合梅链式反应(Polymerasechain reaction)的基本原理,应用复合PCR检测感染的腹膜透出 液的金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,SA)和白 色念珠菌(Candidaalbicans,CA)。分别根据编码SA的耐 热核酸酶nuc基因,CA的5SrRNA区特异的非转录区设计 合成二对引物,探索用复合PCR方法检测这二种病原体 DNA的反应体系和反应条件。针对设计合成的每一对引 物,对4种细菌、3种真菌的DNA进行PCR检测,观察 引物的特异性。分别用SA、CA标准菌株不同浓度的菌液 提取模板DNA,检测该反应对每种病原体的敏感性。第一章文献综述 PCR足种在体外模拟白然DNA复制过程的核酸扩增 技术,山1985年问世以米,在基因诊断中得到了广泛应用,并有原有基础1结合各种牛化、分子牛物学技术衍生了许 多改良技术,其中复合PCR即为具中的种。以多对引物 同时扩增不间目的DNA片段使检测经济和缩短时间,具 有传统方法不可比拟的优越性。囚此,本文就有关内容加 以综述.一、PCR的基本原理 PCR又称体外扩增技术,可于短时间内在试管中获得 数白万个特片DNA序列的拷贝,其特异件是出两个人T 合成的引物序列决定的。所谓引物就是与待扩增的DNA 片段两翼上补的寡核酸链,比本质是单股DNA片段。