[甲型肝炎病毒基因在伤寒杆菌中的表达]金玉姬

【甲型肝炎病毒基因在伤寒杆菌中的表达】金玉姬.pdf借此论文首页向尊敬的导 师许昶教授致以崇高的敬意和 衷心的感谢!白求恩医科大学 硕士研究生论文 中文摘要 [目的] 甲型肝炎病毒全部开放读码框架cDNA序列在伤寒杆菌中的表达,为研制安全、有效、廉价、使用方便的新型疫苗奠定基础.[方法] 将甲型肝炎病毒全部开放读码框架cDNA序列正向克隆到高效原核 表达质粒PBV22的PP强启动子下游,构建成重组表达质粒P22HAV 并将此阳性重组质粒用电转移法转化减毒的伤寒杆菌BRDso中,用平板 筛选法筛选出转化成功的伤寒杆菌,用温度诱导法诱导目的基因在伤寒 杆菌中进行表达。对表达产物进行SDS-PAGE和Westernblot检测。白求恩医科大学 硕士研究生论文 组于痘苗病毒,用ELISA法检测结果表明,重组痘苗病毒能完整表达甲 肝病毒的所有结构蛋白,免疫家兔后都产生了中和抗体。鉴于此点,本 文设计克隆目的基因时,克隆了HAV全部开放读码框架cDNA,并在减毒 的伤寒杆菌中成功的表达了申型肝炎病毒抗原.目前国内外用于表达HAV结构蛋白的载体主要有两类:一类是真核 表达载体,“类是原核表达载体。在真核表达载体中常用的是痘苗病毒 和杆状病毒。但是,痘苗病毒本身引起的副作用和杆状病毒的宿主范围 有限,使它们不适宜发展成为基因工程活载体疫苗。原核表达载体包括 大肠杆菌、沙门氏菌等。
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