【改进抗体结合特性的固相竞争法AFP试剂盒的研制】聂德志.pdf

谨以此篇首页献给三年来悉心培育我的马世盐副教授,并致以深深的谢意！

摘审胎蛋白(简称AFP)是一和与肝癌相关的抗原,准确定量检测AFP对诊断原发性肝细胞癌,以及对于监护胎儿发育具有重要作用。目前我国仍普遍采用法相双抗法检测AFP,而比之简便,快速的固相竞争免疫分析法因均一性影响和一直没有被得到广泛应用。本文采用酸性条件下,使抗体发生部分变性,抗体的构象发生改变,打开抗体绞链区的部分结构,使抗体暴露更多的结合位点,增强抗体的亲水性,从而使抗体在固相载体表面形成单层,均匀,大面积地牢固吸附。经用该方法包谈的固相载体测 AFP,其均一性明显改善,测定同一份血清批内误差 CV=2 ,批间误差CV=8.

前言目前的固相免疫分析,普遍采用物理吸附法,将免疫配基结合于最常用的固相载体(聚苯乙烯)。但因聚乙烯对蛋白的吸附力较弱川,造成分析结果均一性,重复性差,难以进行准确的定量测量.为了解决这一问题,近廿余年来,许多研究者曾作了大量研究和探索,例如用丙基三氧硅,牛血清白蛋白及ConA等做为中介体连接载体与蛋白。还有用化学方法活化聚苯乙烯载体表面后,使之与蛋白质共价结合10-16,但均未获满意结果。且多不能被复试所证明。