【应用聚合□链反应方法对人T淋巴细胞抗原受体αβ链cDNA的研究】杨永广.pdf

在三年的学习和生活中,我的导师刘树铮教授给予我悉心的指教和殷切的教海,使我顺利地完成了博士研究生的论文工作。我愿借此机会,向我的导师表示深深的敬意并致以衷心的感谢。

1.动物实验.人自身免疫疾病(二)y型TCR的异常增多 1.原发性免疫功能不全 2.骨髓移植.感染.其它第二章材料与方法一、实验材料二、主要仪器三、实验方法(一)RNA提取(二)PCR法扩增TCRcDNA(三)DNA琼脂糖凝胶电泳(四)Southern印迹杂交(五)扩增cDNA的大小选择及回收(六)cDNA分子克隆(七)转化(八)cDNA克隆杂交(九)提取质粒(十)cDNA碱基序列测定 1.cDNA克隆的序列测定 2.

摘要本文以人HLA一DR(DKT2)特异反应性T淋巴细胞克隆5D1细胞及人T淋巴细胞白血病细胞Molt3.Hut78细胞为研究材料,建立了T淋巴细胞抗原受体(T cellreceptor,TCR)cDNA的分析方法一Anchor一LigationPCR方法,并在此基础上,着重对5D1细胞的TCRa和B链cDNA结构进行了研究.一、Anchored PCR和Anchor-LigationPCR 本实验在TCRcDNA分子克隆时,首先采用AnchoredPCR和Anchor 一LigationPCR方法,对5端序列不清的TCRcDNA进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳及Southern转印杂交