【乙二胺修饰法标记生物素DNA探针制备和应用的研究】刘锺璸.pdf
在三年的学习和生活中,我的导师杨贵贞教授给予 我悉心的指导和殷切的教诲,使我顺利地完成了博 士研究生的论文互作,我愿借此机会,向我的导师 表示由衷的敬意并致以深深的谢意！
(六)质粒DNA的提取 1.质粒DNA的小量快速提取 2.质粒DNA的大量提取(七)质粒DNA的纯化与限制性酶切(八)cDNA片断的回收(九)DNA和RNA浓度、纯度的测定 1.紫外分光光度法 2.琼脂糖凝胶电泳法(十)生物素-N-羟基琥珀酰亚胺酯的制备(十一)探针标记 1.乙二胺修饰法标记生物素 2.溴化法标记生物素 3.“缺口翻译”法标记生物素 4.“缺口翻译法标记S(十二)预杂交和杂交 1.预杂交条件 2.杂交条件 3.斑点杂交膜的准备 4.Southern杂交膜的准备 5.Northern杂交膜的准备 6.菌落原位杂交膜的准备 7.
第四章讨 论 本文建立的DNA探针方法与其它同类方法的比较 1.与同位素标记DNA探针方法比较 2.与其它生物索标记DNA探针方法比较 3.对原方法的改进 二、影响生物索标记DNA探针检测敏感性及其它检测效果的一些因素1.探针长度 2.DNA变性条件 3.标记条件 4.杂交条件 5.显色检测条件 三、乙二胺修饰法标记生物素DNA探针的应用 1.Southern杂交检测IL—2Ra单拷贝基因 2.Northern杂交检测IL-2RamRNA 3.斑点杂交检测IL一2RamRNA 4.菌落原位杂交筛选鼠IL-6cDNA阳性克隆 小结 致谢.* 参考文献 英文摘要