【大鼠1-25-二羟胆钙化醇受体基因的研究】谷秀彬.pdf
借此论文首页,首先向我的导师石育原 教授,科室老主任麦荫乔教授在三年的研究 生学习期间给予我悉心培养,热心教诲和精 心地指导致以深深地谢意。
英文缩写 DICC 1,25-dihydroxy cholecaleiferol DHCCR 1,25-dihydroxy cholecalciferolrecepto DCC Dextran-Coated Charcail CDNA complementary DNA mRNA messenger RNA LB lusia-Beitani medium EDTA ethylene diamine tetra acetic acid TE Tris-HCl/EDTA buffer pUC-DHCCR pUC Recombinant with DHCCR cDNA Ca-BP Ca-Depend
一.DHCCR重组DNA细菌克隆:分别采用Ca2+和Mg2+处理 肠杆菌JM109进行转化实验,使含有DHCCR的基因质粒转化到 菌中以获得克隆,经氨苄青霉素(AMP)及IPTG-Xga1筛选及 制性酶切分析,证明转化子为阳性,其插入的限制性片段为 78Kb.二,DHCCRCDNA探针的制备:建立适合基因表达和单拷备 因纯度检测以及高灵敏度cDNA探针的制备方法。在制备过程,采用了同位素与非同位素两种手段标记DHCCRCDNA探针,行同源质粒杂交显示两种方法不同的优越性,即同位素方法 然灵敏度高(比非同位素法明显高6倍),但弊病较多.而非 位素法经济,简单,便于应用.三.