【人心肌线粒体型天门冬氨酸氨基转移□纯化单克隆抗体制备及测定方法的建立和初步应用】王晓明.pdf

在三年研究生学习期间,导师孙荣武教授给予我殷切教诲和悉心指导,借此论文首页,向尊敬的导师表示我深深的谢意！

第三部分测定-AST的方法建立及应用一、主要实验材料、试剂和仪器－－-19 二、方法 -20 免疫抑制法的建立-20 1.原理 -20 3.条件现察及选择-20 3.结果与分析-20 双抗体夹心ELISA法测-AST酶蛋白合量方法的建立1.兔抗人m-AST-PeAb-BEP的制备-23 2.HcAb-PcAb-ERP双抗体夹心ELISA法润m-AST酶蛋白-23 3.条件观察及选择-23 4.

摘歡要本文利用离子交换层析和亲和层析从人心肌中提取线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶(AST),提纯品经SDS-PAGE电泳和免疫电泳鉴定。均只有一条蛋白带,经生物化学性质鉴定,证明提纯品是m-AST,且达到了免疫电泳纯.将纯化m-AST免疫兔子,获得了效价高,特异性强的多克隆抗体,经杂交瘤技术获得五株分泌鼠抗人m-AST单克隆抗体的细胞,免疫球旦白分类及其亚类鉴定,各HcAb均为IgG类,其中四株为IgG亚类,一株为IgGa 亚类.所有McAb特异性强,亲和力高.用间接ELISA法检测抗体滴度为 10-10-,抗原决定簇分析,m-AST-McAb均为抗不同抗原决定簇。