【抗人成骨肉瘤单克隆抗体制备及其特性研究】李宏伟.pdf

在三年研究生学习期间,导师李校田教授、段德生教授给予我悉心的指导和淳淳教诲,使我顺利地完成了本课题的实验互作,值此论文完成之际,借论文首页,向我的二位恩师致以哀心的感激和深深的谢意！

摘要本文以骨肉瘤细胞系0S-732为免疫原,免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,将骨髓瘤细胞系NS-1与免疫小鼠的脾细胞融合。经酶联免疫吸附实验(ELISA法)筛选,共获得六株分泌抗人成骨肉瘤单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,在小鼠腹腔和组织培养中都能稳定地分泌高滴度的McAb。经染色体核型分析证明:该杂交瘤细胞系小鼠脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞的融合细胞。此细胞扩培养后,注入BALB/C小鼠腹腔,收集腹水型抗体,用间接ELISA法测定所制备McAb效价为10-.10-7。采用免疫双向扩散法对McAb进行免疫球蛋白类及亚类鉴定,所制备的 McAb均为IgG1。

前盲骨肉瘤是骨原发恶性肿瘤中发病率最高的一种。据统计,国外占骨原发恶性肿瘤的20 ,国内占34.66。青少年发病床研究表明保留肢体的骨肉瘤整段切除与传统截肢的局部复发率均为5 左右[6]。该病对放射治疗不敏感,对化疗效果不显著[8],使其疗效不佳,此外,骨肉瘤患者免疫功能低下[9亦起著一定作用。因此,对该病的免疫学治疗十分必要。McAb的问世为骨肉瘤免疫学研究开辟了广阔的前景,提高其应用效果的前提在于研制出多种具有高特异性的BcAb。用BcAb为互具,研究骨肉瘤相关抗原的表达,对该病进行早期诊断和导向治疗,是一一条大有希望的途径。